Клиническая и экспериментальная морфология Том 8. №3 / 2019

Научно-практический рецензируемый журнал
Научно-исследовательского института морфологии человека РАМН

Обзоры литературы

В.Б. Соболев, Р.М. Худоерков
Роль альфа-синуклеина в нейродегенеративном процессе
5

Подробности

В работе рассматриваются многие ключевые вопросы о месте и роли альфа-синуклеина и его модифицированных форм в патологическом процессе нейродегенерации при паркинсонизме. Обсуждаются данные патологической анатомии, цитологии и гистологии, генетики, полученные на материале человека, животных и клеточных моделях. В статье уделяется внимание заблуждению, что агрегаты альфа-синуклеина, входящие в состав телец Леви, обнаруживаются только в структурах центральной нервной системы. Современные данные показывают активное включение периферической нервной системы в этот процесс. Накопленные данные демонстрируют большое значение альфа-синуклеина при до сих пор не ясном механизме включения этого белка в патологический процесс.

Ключевые слова: альфа-синуклеин, паркинсонизм, прион, гипотеза Браака, патогенез болезни Паркинсона, тельца Леви

Для корреспонденции: Валерий Борисович Cоболев. E-mail: vsobolev@outlook.com

Для цитирования: В.Б. Соболев, Р.М. Худоерков. Роль альфа-синуклеина в нейродегенеративном процессе. Клин. эксп. морфология. 2019; 8(3):5-12. DOI: 10.31088/CEM2019.08.03.01

Финансирование. Исследование выполнено в рамках государственного задания.

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Статья поступила 12.04.2019. Получена после реценцирования 22.05.2019. Принята в печать 04.06.2019.

Д.А. Отлыга, О.А. Юнеман, Е.Г. Цветкова, С.В. Савельев
Функциональная морфология сонного гломуса человека
13

Подробности

Параганглионарная система – одна из наименее изученных систем организма, тесно взаимодействующая с автономной нервной системой. Наиболее исследованным органом этой системы является сонный гломус – маленький орган, расположенный в области бифуркации общей сонной артерии. В обзоре обобщена более чем 250-летняя история изучения морфологии и физиологии сонного гломуса, рассмотрены его анатомические, гистологические, ультраструктурные особенности и иммуногистохимические характеристики. Являясь периферическим хеморецептором, сонный гломус реагирует на изменения pH крови, парциального давления кислорода и углекислого газа. Рефлекторным путем орган влияет на функции дыхательной и сердечно-сосудистой систем, регулируя частоту и глубину дыхания, тонус гладкой мускулатуры бронхов, частоту и силу сердечных сокращений. В связи со сложными взаимодействиями между параганглионарной и автономной нервной системами данный орган может быть мишенью при лечении таких заболеваний как бронхиальная астма, хроническая обструктивная болезнь легких и артериальная гипертензия. Несмотря на значительные успехи в изучении органа, до сих пор возникают противоречия и трудности, которые стоят перед учеными и практическими врачами. Так, до сих пор нет окончательного ответа о влиянии сонного гломуса на моторику бронхов и артериальных сосудов, что затрудняет создание стройной теории его роли в патогенезе бронхиальной астмы и гипертонической болезни. До настоящего времени практически не изучены синаптогенез и пролиферация клеток сонного гломуса в норме и при патологии, практически нет данных по эмбриональному развитию сонного гломуса человека. Целью дальнейших исследований должна стать разработка теорий, которые описывали бы работу этого органа в целом организме, а не ограничивались описанием группы молекул, выделяемых им в ответ на определенные стимулы.

Ключевые слова: сонный гломус, каротидное тело, параганглионарная система, хеморецепция, бронхиальная астма, ХОБЛ, артериальная гипертензия

Для корреспонденции: Дмитрий Александрович Отлыга. E-mail: otlyga@bk.ru

Для цитирования: Д.А. Отлыга, О.А. Юнеман, Е.Г. Цветкова, С.В. Савельев. Функциональная морфология сонного гломуса человека. Клин. эксп. морфология. 2019; 8(3): 13-20. DOI: 10.31088/CEM2019.08.03.02

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов

Статья поступила 09.04.2019. Получена после рецензирования 14.05.2019. Статья принята в печать 04.06.2019.

А.Ю. Пульвер, Б.Е. Лейбович, Р.А. Полтавцева, А.Н. Шевцов, Н.А. Пульвер
Разновидности бесклеточных каркасов в тканевой инженерии и способы их получения
21

Подробности

Актуальность: создание рассматриваемых в статье основных разновидностей биоинженерных бесклеточных каркасов (внеклеточных матриксов, ВКМ) стало признанным методом в бурно развивающейся области регенеративной медицины.

Цель исследования: анализ источников литературы, рассматривающих проблемы создания искусственных трехмерных каркасов, имитирующих состав и функции ВКМ, для обеспечения микроокружения, близкого к естественному, в дискурсе сравнения преимуществ использования различных нативных ВКМ, взятых из тканей и органов, а также синтезированных in vitro клеточными культурами.

Материалы и методы: обзор источников литературы. Результаты: рассмотрены свойства ВКМ in vivo и in vitro, а также основные разновидности современных методов децеллюляризации, с упором на органо- и тканеспецифичные разновидности ВКМ.

Выводы: проведено развернутое сравнение преимуществ и недостатков различных типов бесклеточных каркасов.

Ключевые слова: 3D клеточные культуры, внеклеточный матрикс, мезенхимальные мультипотентные стромальные клетки, тканевая инженерия

Для корреспонденции: Борис Ефимович Лейбович. E-mail: bel.46@mail.ru

Для цитирования: А.Ю. Пульвер, Б.Е. Лейбович, Р.А. Полтавцева, А.Н. Шевцов, Н.А. Пульвер. Разновидности бесклеточных каркасов в тканевой инженерии и способы их получения. Клин. эксп. морфология. 2019;8(3): 21-27. DOI: 10.31088/CEM2019.08.03.03

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов

Статья поступила 31.07.2019. Получена после рецензирования 22.08.2019. Принята в печать 18.09.2019

 

Оригинальные исследования

А.П. Милованов, А.Н. Шувалов, Т.В. Фокина, В.А. Мхитаров
Уменьшение количества вирусэкспрессирующих клеток в плаценте после лечения рекомбинантным интерфероном альфа 2в хронической микст-вирусной инфекции у беременных женщин
28

Подробности

Введение. В последние годы большое внимание уделяется микст-вирусным инфекциям как этиологическим причинам спонтанных выкидышей, неразвивающейся беременности, преждевременных родов и других акушерских осложнений. Остается много неясных вопросов о путях инфицирования матерей, проницаемости плацентарного барьера, тропности отдельных вирусов в отношении плацентарных и материнских клеток. Ведутся интенсивные поиски новых лечебных подходов в лечении вирусных инфекций у беременных женщин. Наиболее перспективной становится интерферонотерапия с помощью эндогенных интерферонов второго поколения: рекомбинантных интерферонов типа I – IFN-α, IFN-β.

Цель исследования – оценка эффективности лечения интерфероном альфа 2в беременных женщин с ранее подтвержденной микст-вирусной инфекцией в цервико-вагинальных смывах (ПЦР анализ) с помощью иммуногистохимической визуализации вирусов в клетках плаценты и базальной оболочки. Материалы и методы. Обследованы две группы по 30 женщин, у которых до беременности в смывах методом ПЦР обнаружены папилломавирус человека (HPV), цитомегаловирус (CMV) и вирус простого герпеса типа 2 (HSV2). Первая группа, кроме витаминов, не использовала другого лечения. Вторая, аналогичная группа женщин получала три цикла интерферона альфа 2в свечах по 500 000 МЕ 2 раза в сутки в течение 10 дней начиная с 14-й недели беременности, далее на 22–24-й и 32–34-й неделях. Родившиеся в срок плаценты изучены морфологическим методом с выявлением и подсчетом лимфолейкоцитарных очагов и иммуногистохимическим анализом в них вирусэкспрессирующих клеток. Проведен статистический анализ полученных данных с использованием U-критерия Манна–Уитни.

Результаты. В плацентах второй группы беременных существенно уменьшилось количество воспалительных очагов (с 48,2 до 30,3%). Антивирусный эффект достоверно зафиксирован в клетках материнской крови между ворсин плацент, децидуальных клетках эндометрия, а также в инвазивных клетках цитотрофобласта. Синцитиотрофобласт ворсин подтвердил высокую устойчивость к CMV, а также особую уязвимость его к HPV и HSV2.

Заключение. Впервые получены морфологические доказательства положительного противовирусного действия этого интерферона на материнские клетки у беременных женщин с хронической микст-вирусной инфекцией.

Ключевые слова: микст-вирусная инфекция, HPV, CMV, HSV2, терапия, интерферон альфа 2в, иммуногистохимия, плацента

Для корреспонденции: Андрей Петрович Милованов. Е-mail a_p_milovanov@mail.ru

Для цитирования: А.П. Милованов, А.Н. Шувалов, Т.В. Фокина, В.А. Мхитаров. Уменьшение количества вирусэкспрессирующих клеток в плацентах после лечения рекомбинантным интерфероном альфа 2в хронической микст-вирусной инфекции у беременных женщин. Клин. эксп. морфология. 2019;8(3):28-34. DOI: 10.31088/CEM2019.08.03.04

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Статья поступила 03.07.2019. Получена после рецензирования 29.08.2019. Принята в печать 18.09.2019

Х.М. Диаб, В.П. Быкова, Х.Ш. Давудов, П.У. Умаров, А.А. Бахтин, Д.А. Загорская, С.Г. Рычкова
Клинико-морфологическая характеристика югулотимпанальных параганглиом
35

Подробности

Введение. Яремно-барабанная параганглиома – достаточно редкая опухоль, которая возникает из клеток нехромаффинных параганглиев, называемых также гломусными тельцами. Параганглиомы могут быть обнаружены в различных органах и тканях, чаще всего это доброкачественные опухоли. Тем не менее, по данным литературы, даже через несколько лет после удачно проведенной операции в редких случаях может наблюдаться метастазирование. Практически все параганглиомы среднего уха или височной кости относятся к югулотимпанальным. Для верификации новообразований соответственно определенному гистологическому типу строения опухолей необходим сравнительный анализ данных морфологического исследования хирургических находок в сопоставлении с результатами лучевой диагностики.

Цели исследования – определить клинико-морфологическую характеристику югулотимпанальных параганглиом, сравнить полученные результаты с данными лучевой диагностики и хирургическими находками. Материал и методы. За период с февраля 2015 по декабрь 2017 года на базе Научно-клинического центра оториноларингологии обследованы и прооперированы 33 пациента с параганглиомами височной кости (пятеро мужчин и 28 женщин) в возрасте от 33 до 82 лет (средний возраст – 62 года). Всем пациентам хирургически удалена параганглиома, в ходе операции выполнен забор материала для гистологического исследования. Материал фиксировали в 10% забуференном формалине в течение 12 часов с последующим изготовлением парафиновых блоков и срезов. Срезы окрашивали по стандартному протоколу гематоксилином и эозином.

Результаты. По данным лучевых методов исследования в зависимости от распространенности опухолевого процесса пациенты были разделены на три клинические группы по классификации U. Fisch. Параганглиома типа А была выявлена у шести пациентов, которые составили группу I. В группу II вошел 21 пациент с опухолями типа В. Группу III составили шесть пациентов, у которых была диагностирована параганглиома типа С. Морфологическое исследование операционного материала пациентов разных клинических групп в зависимости от количества и расположения гломусных клеток, сосудов, нервных стволиков и фиброзных прослоек позволило разделить опухоли на следующие морфологические типы: альвеолярный, аденомоподобный, ангиомоподобный, компактный и смешанный.

Выводы. В зависимости от места локализации и степени распространения процесса каждому клиническому типу новообразований соответствовал определенный гистологический тип строения опухолей: для опухолей типа А (18,2%), ограниченных промонториумом, характерен аденомоподобный или компактный тип строения опухоли, для опухолей типа В (63,6%), характерны аденомоподобный, ангиомоподобный и смешанный тип, а у пациентов с опухолью типа С (18,2%) преобладал смешанный тип.

Ключевые слова: параганглиомы височной кости, хирургическое лечение, клинико-морфологическая характеристика

Для корреспонденции: Загорская Дарья Алексеевна. E-mail: leunina.d@yandex.ru

Для цитирования: Х.М. Диаб, В.П. Быкова, Х.Ш. Давудов, П.У. Умаров, А.А. Бахтин, Д.А. Загорская, С.Г. Рычкова. Клинико-морфологическая характеристика югулотимпанальных параганглиом. Клин. эксп. морфология. 2019;8(3):35-40. DOI: 10.31088/CEM2019.08.03.05

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов

Статья поступила 01.04.2019. Получена после рецензирования 07.05.2019. Принята в печать 04.06.2019.

Р.В. Янко, Е.Г. Чака, М.И. Левашов
Морфологические изменения щитовидной железы крыс после введения хлорида магния
41

Подробности

Введение. Магний принимает непосредственное участие в функционировании щитовидной железы. Тем не менее данные о гистоморфологических изменениях железы после введения ионов магния неоднозначны. Это может быть связано с применением различных источников магния в экспериментах, разной дозировкой магнийсодержащих препаратов, использованием в опытах животных неодинакового возраста, сезонностью и продолжительностью проведения экспериментов. Цель – исследование морфологических изменений щитовидной железы молодых крыс после введения хлорида магния.

Материал и методы. Эксперименты были выполнены на 24 крысах – самцах линии Вистар 3-месячного возраста. Подопытные животные в дополнение к стандартному рациону питания ежедневно в течение 21 суток получали хлорид магния в дозе 50 мг/кг массы тела. Из ткани щитовидной железы изготавливали гистологические препараты по стандартной методике. Морфометрию железы осуществляли на цифровых изображениях с помощью компьютерной программы Image J. В сыворотке крови и суспензии эритроцитов определяли содержание катионов магния.

Результаты. Полученные данные свидетельствуют о том, что 21-суточное введение хлорида магния крысам приводит к снижению площади поперечного сечения фолликулов и коллоида, росту фолликулярно-коллоидного индекса, количества тиреоцитов в фолликуле, резорбционных вакуолей в коллоиде, увеличению численности интерфолликулярных островков, снижению индекса накопления коллоида, уменьшению относительной площади стромы в железе. У подопытных крыс выявлено умеренное повышение содержание магния в суспензии эритроцитов.

Заключение. Введение хлорида магния сопровождается появлением морфологических признаков активации синтетической активности щитовидной железы.

Ключевые слова: магний, щитовидная железа, морфометрические показатели

Для корреспонденции: Роман Васильевич Янко. E-mail: biolag@ukr.net

Для цитирования: Р.В. Янко, Е.Г. Чака, М.И. Левашов. Морфологические изменения щитовидной железы крыс после введения хлорида магния. Клин. эксп. морфология. 2019;8(3):41-47. DOI: 10.31088/ CEM2019.08.03.06

Финансирование. Работа выполнена в рамках государственного задания Института физиологии им. А.А. Богомольца НАН Украины (№ 0116U004472)

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов

Статья поступила 07.08.2019. Получена после рецензирования 27.08.2019. Принята в печать 18.09.2019.

Г.В. Брюхин, С.Д. Антонов
Характеристика сперматогенного эпителия семенников половозрелого потомства самок крыс с экспериментальным сахарным диабетом 1-го типа при действии иммобилизационного стресса
48

Подробности

Введение. Экстрагенитальные заболевания матери, среди которых особое место занимает сахарный диабет 1-го типа, вызывают у потомства комплекс разнообразных морфологических, нейрохимических, эндокринных, метаболических изменений. Особенности морфофункционального становления мужской репродуктивной системы у потомства матерей с сахарным диабетом 1-го типа изучены недостаточно.

Цель исследования – анализ морфофункционального состояния сперматогенного эпителия семенников половозрелого потомства самок крыс с экспериментальным сахарным диабетом 1-го типа, подвергшегося иммобилизационному стрессу. Материалы и методы. Диабет матери моделировали с помощью стрептозотоцина. Оценку морфологических особенностей сперматогенного эпителия проводили на серийных гистологических срезах, окрашенных гематоксилином и эозином, далее определяли толщину сперматогенного эпителия, оценку суммарного содержания сперматогенных клеток и их субпопуляционного состава, а также количества сустентоцитов. Для выявления более тонких нарушений сперматогенного цикла экспериментальных животных вычисляли ряд общепринятых индексов, в том числе сперматогенеза, релаксации сперматогенеза и герминативного индекса. Для оценки резистентных свойств развивающихся половых клеток подопытных животных подвергали воздействию иммобилизационного стресса.

Результаты. Установлено, что клетки сперматогенного эпителия потомства самок крыс с экспериментальным сахарным диабетом обладают сниженной резистентностью, о чем свидетельствует более выраженное, чем в контроле, уменьшение под влиянием стрессового фактора концентрации сперматозоидов, а также снижение содержания сперматогенных клеток и изменение их субпопуляционного состава.

Заключение. Полученные результаты позволяют сделать заключение, что сахарный диабет 1-го типа матери вызывает снижение стрессрезистентности сперматогенных клеток потомства.

Ключевые слова: сахарный диабет, эксперимент, крыса, семенник, стресс

Для корреспонденции. Сергей Дмитриевич Антонов. E-mail: S.d.antonov@mail.ru

Для цитирования. Г.В. Брюхин, С.Д. Антонов. Характеристика сперматогенного эпителия семенников половозрелого потомства самок крыс с экспериментальным сахарным диабетом 1-го типа при действии иммобилизационного стресса. Клин. эксп. морфология. 2019;8(3):48-54. DOI: 10.31088/CEM2019.08.03.07

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Статья поступила 09.08.2019. Получена в исправленном виде 29.08.2019. Принята в печать 18.09.2019.

Методы

Е.А. Пономаренко, О.В. Макарова, А.М. Косырева, М.В. Кондашевская, М.А. Диатроптова, И.С. Цветков, А.А. Степанов, Л.П. Михайлова, К.А. Артемьева
Сравнительная характеристика методов выделения клеток сперматогенного эпителия
55

Подробности

Введение. Для изучения биохимических и молекулярно-биологических механизмов процессов сперматогенеза в норме и при его нарушениях необходимо получить изолированные клетки сперматогенного эпителия разных стадий дифференцировки. Клетки сперматогенного эпителия соединены между собой плотными контактами и цитоплазматическими мостиками, разрушение которых позволяет получить суспензию клеток. Для разделения клеток используют ряд методов, включая механический и ферментативные. Состав, концентрация ферментов и время воздействия, применяющиеся разными авторами, широко варьируют. Тем не менее работы по сравнительной оценке эффективности методов выделения клеток сперматогенного эпителия в литературе отсутствуют.

Цель исследования: проведение сравнительного анализа эффективности механического и ферментативных методов выделения клеток сперматогенного эпителия у мышей и определение оптимального способа. Материалы и методы. В работе использованы самцы половозрелых мышей линии С57BL/6. Клетки выделяли в соответствии с протоколами ферментативных методов по M.L. Meistrich (n=10 – число семенников), Н.Н. Мушкамбарову (n=8) – с использованием ферментов коллагеназы, трипсина, ДНКазы в разных концентрациях, T.G. Pretlow (n=12) – с использованием фермента проназы, Y. Wang (n=8) – с применением фермента гиалуронидазы и механического метода по D. Lam (n=8). Оценивали количество полученных клеток на 1 мг ткани семенника, их жизнеспособность и наличие симпластов (реагрегатов).

Результаты. При использовании разных ферментов, включая проназу, после выделения клеток сперматогенного эпителия и через сутки хранения суспензии клеток в культуральной среде при температуре +4°С получено большое количество клеток сперматогенного эпителия, и их жизнеспособность составила 87–91%. При механическом методе выделения клеток сперматогенного эпителия количество полученных клеток было большим, но наблюдали их низкую жизнеспособность и прогрессирующую гибель в течение суток.

Заключение. По результатам сравнительного анализа оптимальным для выделения клеток сперматогенного эпителия является метод с проназой Е. Он позволяет получить достаточное количество жизнеспособных клеток с небольшим числом симпластов.

Ключевые слова: сперматогенный эпителий, сперматоциты, сперматиды, методы выделения

Для корреспондеции: Елена Алексеевна Пономаренко. Е-mail:ponomarenkoea75@mail.ru

Для цитирования: Е.А. Пономаренко, О.В. Макарова, А.М. Косырева, М.В. Кондашевская, М.А. Диатроптова, И.С. Цветков, А.А. Степанов, Л.П. Михайлова, К.А. Артемьева. Сравнительная характеристика методов выделения клеток сперматогенного эпителия. Клин. эксп. морфология. 2019;8(3):55-63. DOI: 10.31088/CEM2019.08.03.08

Конфликт интересов. Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Статья поступила 26.06.2019. Получена после рецензирования 20.08.2019. Принята в печать 18.09.2019

 

Е.В. Бондаренко
Оптимизация фиксации и транспортировки биопсийно-операционного материала щитовидной железы
64

Подробности

Введение. Имеющиеся стандарты хранения и транспортировки биопсийного материала, получаемого после операции на щитовидной железе, не всегда обеспечивают высокое качество изготовляемых гистологических срезов.

Цель данного исследования – изучить влияние использования прибора – термостата при фиксации и транспортировке биопсийно-операционного материала щитовидной железы на качество получаемых микропрепаратов.

Материалы и методы. Проанализированы результаты применения прибора при хранении и транспортировке операционного материала щитовидной железы от 354 пациентов. Материал от 10 пациентов с многоузловым зобом был разделен на две равные части (правая и левая доли) и обработан рутинным методом с фиксацией при комнатной температуре и с использованием прибора – термостата.

Результаты. Представлена характеристика оригинального портативного автономного легко переносимого термостата для хранения при постоянной температуре биопсийного и операционного материала для морфологического исследования. Благодаря имеющемуся автономному электроснабжению транспортировка возможна на любые расстояния. Получаемые с использованием термостата гистологические срезы органа характеризовались высоким качеством и четкостью, что позволяло проводить морфологическое исследование в оптимальных условиях и в более короткие сроки.

Заключение. Полученные результаты доказывают высокую эффективность данного прибора в практике патологоанатомического исследования – оптимизацию фиксации и транспортировки биопсийно-операционного материала щитовидной железы, позволяют получить гистологические срезы высокого качества и в полной мере оценить основные морфологические изменения в ткани щитовидной железы.

Ключевые слова: щитовидная железа, гистология, фиксация, срезы, термостат

Для корреспонденции: Бондаренко Екатерина Владимировна. E-mail: ekaterinabondarenko@inbox.ru

Для цитирования: Е.В. Бондаренко Оптимизация фиксации и транспортировки биопсийно-операционного материала щитовидной железы. Клин. эксп. морфология. 2019;8(3):64-68. DOI: 10.31088/ CEM2019.08.03.09

Конфликт интересов. Автор заявляет об отсутствии конфликта интересов.

Статья поступила 22.07.2019. Получена после рецезирования 07.08.2019. Принята в печать 18.09.2019

Вышедшие номера журнала